煙酰胺腺嘌呤二核苷酸性質(zhì)、用途與生產(chǎn)工藝
煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(縮寫為NAD)，也稱為二磷酸吡啶核苷酸(縮寫為DPN)，或 輔脫氫酶Ⅰ或輔酶Ⅰ。在哺乳動物體內(nèi)存在氧化型(NAD+)和還原型(NADH)兩種狀態(tài)，氧化型 (NAD+)在260nm處具有最大紫外吸收光譜，通過各種脫氨酶，從底物中接受一個氫原子和一個電子，變成還原型(NADH)，在340nm處有最大吸收。
β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸在氧化還原反應(yīng)中用作輔酶，在ADP核糖基化反應(yīng)中作為ADP核糖部分的供體，也作為第二信使分子環(huán)ADP核糖的前體。β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸還充當細菌DNA連接酶和一組稱為sirtuins的酶的底物，這些酶使用NAD+從蛋白質(zhì)中去除乙?；?。
煙酰胺腺嘌呤二核苷酸參與細胞物質(zhì)代謝、能量合成、細胞DNA修復(fù)等多種生理活動，對機體免疫能力有重要作用。在健康狀態(tài)下，人體內(nèi)煙酰胺腺嘌呤二核苷酸濃度穩(wěn)定，維持各項細胞正常功能。體內(nèi)的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸濃度決定了細胞衰老的過程和程度，濃度下降會加速細胞衰老的過程。研究表明，NAD+對缺血手術(shù)引起的腎臟梗死具有保護作用，可以顯著減少血清中尿素氮、肌酐水平；NAD+對缺血手術(shù)引起的腎小管損傷具有保護作用。NAD+(煙酰胺腺嘌呤二核苷酸，Nicotinamideadeninedinucleotide，簡稱NAD+)可以有效保護腎臟缺血引起的腎臟損傷，NAD+在制備防治腎臟缺血性損傷藥物中有重要應(yīng)用價值。
另外，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸在制備治療炎性痛藥物中具有一定的應(yīng)用，NAD+通過依賴NAD+的去乙酰化酶SIRT1和SIRT2參與調(diào)節(jié)福爾馬林和完全弗氏佐劑(CFA)誘發(fā)的炎癥痛，而SIRT1和SIRT2通過不同機制參與NAD+對炎癥痛的抑制作用，從而達到對炎性痛具有鎮(zhèn)痛的作用。
CN201511022464.3提出的一種煙酰胺腺嘌呤二核苷酸的制備方法，包括如下步驟：
S1、破碎細胞：將酵母細胞加入鹽酸水溶液中浸泡0.5-2.5h，進行溫差破壁處理 后，用陶瓷膜過濾，取濾液得到清液A；
S2、濃縮：取S1中得到的清液A超濾，取超濾液納濾得到濃縮液B，用鹽酸水溶液調(diào) 節(jié)濃縮液B的pH＝2-2.5得到濃縮液C；
S3、洗脫：將S2中得到的濃縮液C過D152樹脂柱，用氨水洗脫，收集洗脫液D，用鹽酸 水溶液調(diào)節(jié)洗脫液D的pH＝7-8后，過717樹脂柱，用氯化鉀水溶液洗脫，收集得到綜合液E；
S4、分離：將S3中得到的綜合液E納濾得到濃縮液F；用硝酸水溶液調(diào)節(jié)濃縮液F的 pH＝1-3，加丙酮沉淀，離心得到固體G；
S5、純化：將S4中得到固體G加水溶解，過制備色譜，脫鹽，分離，收集分離液，濃縮， 凍干得到煙酰胺腺嘌呤二核苷酸。
化學性質(zhì)
白色粉末，易吸濕，水溶液呈酸性。固體在干燥條件下穩(wěn)定，本品的中性或弱酸性水溶液室溫可保存7天，遇堿和熱加速變質(zhì)、分解。比旋光度[α]
23D-34.8°(1%，水)；其水溶液在260nm、340nm波長處有最大吸收。易溶于水，不溶于丙酮等有機溶劑。
用途
是生物體內(nèi)必需的一種輔酶，用于生化研究，臨床診斷，臨床藥物及藥物研究。
用途
參與體內(nèi)的能量代謝和物質(zhì)代謝，有利于細胞的修復(fù)和更新。用于冠心病、心肌炎、白細胞減少等癥的治療。
用途
煙酰胺腺嘌呤二核苷酸是一種輔酶類藥。臨床上主要用于冠心病的輔助治療，能改善胸悶、心絞痛等癥狀。不良反應(yīng)偶見口干、頭暈、惡心等。
用途
煙酰胺腺嘌呤二核苷酸是一種轉(zhuǎn)遞質(zhì)子（更準確來說是氫離子）的輔酶，它出現(xiàn)在細胞很多代謝反應(yīng)中。NADH或更準確NADH + H+是它的還原形式。它可以被還原，最多攜帶兩個質(zhì)子（寫為NADH + H+）。NAD+是脫氫酶的輔酶，如乙醇脫氫酶(ADH)，用于氧化乙醇。它在糖酵解、糖異生、三羧酸循環(huán)及呼吸鏈中發(fā)揮著不可替代的作用。中間產(chǎn)物會將脫下的氫遞給NAD，使之成為NADH + H+。而NADH + H+則會作為氫的載體，在呼吸鏈中通過化學滲透偶聯(lián)的方式，合成ATP。
在吸光方面，NADH+H+在260nm和340nm處各有一吸收峰，而NAD+則只有260nm一處吸收峰，這是區(qū)別兩者的重要屬性。這同時也是很多代謝試驗中，測量代謝率的物理依據(jù)。NAD在260nm的吸光系數(shù)為1.78*104L /(mol*cm)，而NADH在340nm的吸光系數(shù)為6.2*10³ L/(mol*cm)。
生產(chǎn)方法
以酵母為原料制得煙酰胺腺嘌呤二核苷酸
破壁、提取、分離 將新鮮壓榨酵母攪拌下加入等量的沸水，加熱至95℃保溫5min，迅速加入兩倍酵母質(zhì)量的冰塊，過濾，濾餅用水洗滌2次，合并濾液和洗液，加入強堿性季銨I型陰離子交換樹脂201×7(717)，攪拌16h，過濾，收集濾液。
新鮮壓榨酵母[沸水、冰塊]→提取液[201×7樹脂]→濾液
吸附、洗脫 濾液用濃鹽酸調(diào)pH=2-2.5，經(jīng)弱酸性丙烯酸系陽離子交換樹脂122柱吸附，用無熱原水洗至流出液澄清為止，再用0.3mol/L氫氧化銨溶液洗脫，當流出液呈淡咖啡色，經(jīng)340nm分光光度計測定吸光度大于0.05時，開始收集，流出液呈淡黃色時停止，得洗脫液。
濾液[pH2-2.5]→吸附物→洗脫液
中和、吸附 將強酸性苯乙烯系陽離子交換樹脂001×7(732)加至洗脫液中，攪拌測pH=5-7，過濾，濾餅用無熱原水洗滌，合并洗液和濾液，加稀氨水調(diào)pH值至7(約15%)，再用強堿性季銨I型陰離子交換樹脂201×7 (717)50-60目柱進行吸附，用無熱原水洗至流出液澄清無色為止。
洗脫液[001×7樹脂，氨水，201×7樹脂]→[pH7]吸附物
洗脫、吸附、洗脫 將766型活性炭60-80目柱與201×7樹脂柱串聯(lián)，用0.1mol/L氯化鉀溶液洗脫，洗脫液立即流經(jīng)活性炭柱進行吸附，吸附完后解除兩柱串聯(lián)，用pH9的無熱原水洗滌，再用pH8的4%乙醇洗滌，最后用無熱原水洗至中性，用體積比為丙酮：乙酸乙酯：水：濃氨水=4：1：5：0.02的混合液洗脫，當洗脫液加3倍丙酮產(chǎn)生白色渾濁時，收集洗脫液。
吸附物[201×7樹脂柱，氯化鉀，766型活性炭]→洗脫液[活性炭柱]吸附物[無熱原水，乙醇]→[洗至中性]吸附物[丙酮，乙酸乙酯，水，濃氨水]→洗脫液
沉淀、干燥 洗脫液在攪拌下加30%-40%硝酸調(diào)pH=2-2.5，過濾，冰庫過夜，過濾，95%的冷丙酮洗滌，真空干燥，得成品。
洗脫液[硝酸]→[pH2-2.5, 0℃]沉淀[丙酮]→[干燥]C0I成品。
生產(chǎn)方法
從鮮酵母提取，步驟如下：新鮮壓榨酵母[破壁，提取]提取液[分離]濾液[一次吸附][洗脫]一次洗脫液[中和][二次吸附][洗脫][三次吸附][洗脫]三次洗脫液[沉淀][過濾][干燥]輔酶I
生產(chǎn)方法
酵母經(jīng)沸水提取，醋酸鉛酸化沉淀得粗品，經(jīng)甲酸型陽離子交換樹脂柱處理，精制而得。
煙酰胺腺嘌呤二核苷酸
上下游產(chǎn)品信息
上游原料
下游產(chǎn)品