80802-79-5
中文名稱
殺菌肽
CAS
80802-79-5
80802-79-5 結(jié)構(gòu)式
物理化學(xué)性質(zhì)
外觀性狀本品結(jié)構(gòu)中的N端15個氨基酸多具有親水性,荷正電;C端多為疏水氨基酸。殺菌肽對熱穩(wěn)定,100℃水浴加熱半小時仍有活力,不易被蛋白酶水解,對核酸酶、淀粉酶、二硫鍵試劑穩(wěn)定,等電點(diǎn)9.8-10.7。
制備方法
方法1
蠶蛹免疫 將蠶蛹用滅活的大腸桿菌K12D31菌株注射,使蠶蛹免疫。穿刺免疫蠶蛹,離心,收集血淋巴細(xì)胞。蠶蛹[大腸桿菌]→免疫蠶蛹[穿刺,離心]→血淋巴細(xì)胞收集液
Sephadex G-75柱層析 用醋酸調(diào)血淋巴細(xì)胞收集液,pH為4,加熱到60℃, 保持10-30min, 速冷。20000×g離心,取上清液,用碳酸鈉調(diào)pH為中性,用Sephadex G-75柱層析。用pH 6.2的磷酸鹽緩沖液(0.2 mol/L)洗脫,用核酸蛋白檢測器檢測,分別收集殺菌肽(粗品)和溶菌酶。
層析、透析、冷凍干燥 將殺菌肽粗品洗脫液用CM-Sephadex CL-6B 層析,用pH 6.2的磷酸鹽緩沖液(0.2 mol/L)洗脫,洗脫部分再用Phenyl-Sephadex-4B疏水層析,殺菌肽被吸附于柱內(nèi),用0.1-0.5 mol/L磷酸鹽緩沖液逆梯度洗脫,收集活性部分。透析除鹽,冷凍干燥得殺菌肽。
殺菌肽洗脫液[CM-Sephadex CL-6B]→洗脫液[Phenyl-Sephadex-4B]→洗脫液[透析]→透析液[冷凍干燥]→殺菌肽凍干品。