4-氨基苯基-ALPHA-D-吡喃甘露糖苷是吡喃甘露糖苷酶的底物，作為快速的分子診斷方法，采用分光光度法檢測(cè)該酶水解4-氨基苯基-ALPHA-D-吡喃甘露糖苷生的對(duì)硝基苯酚的吸光度，確認(rèn)其酶學(xué)活性，判斷是否存在吡喃甘露糖苷酶的活性升高或降低以及酶是否存在缺失等情況。

(1)在120℃，向100mL圓底燒瓶中依次加入制備例1所得到的1，2，3，4，6-五-O-乙?；?α-D-甘露糖(12.82mmol)、對(duì)硝基苯酚(51.28mmol)和四氯化鋯(1.03mmol)，減壓至0.08MPa，攪拌熔融，1.3h后，TLC檢測(cè)反應(yīng)完全。取上述反應(yīng)液直接進(jìn)行柱層析(V(石油醚)∶V(乙酸乙酯)＝3∶1)分離。得到4.93g對(duì)硝基苯基-2，3，4，6-四-O-乙?；?α-D-吡喃甘露糖苷，產(chǎn)率81.9％。對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行了1H-NMR、旋光以及熔點(diǎn)表征，確認(rèn)為目標(biāo)產(chǎn)物。

(2)室溫下，向100mL圓底燒瓶加入步驟(1)制得的對(duì)硝基苯基-2，3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-吡喃甘露糖苷(10.51mmol)和40mL無(wú)水甲醇，滴加10％(重量百分比)的甲醇鈉/甲醇溶液，調(diào)節(jié)pH值為10左右，攪拌反應(yīng)5h，TLC檢測(cè)反應(yīng)完全，加入適量陽(yáng)離子樹(shù)脂調(diào)節(jié)pH值為7，過(guò)濾，并將濾液濃縮，柱層析(V(乙酸乙酯)∶V(甲醇)＝10∶1)分離，得到4-氨基苯基-ALPHA-D-吡喃甘露糖苷2.63g，產(chǎn)率83.1％。對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行了1H-NMR、旋光以及熔點(diǎn)表征，確認(rèn)為目標(biāo)產(chǎn)物。